梔陳消癭膠囊是由柴胡、赤芍、茯苓、黃芩、當(dāng)歸、牡丹皮、梔 子、陳皮等十二味藥組成，有消癭抑亢、平衡陰陽的功效，主要用 于甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)。方中梔子、赤芍、陳皮均發(fā)揮重要作用，梔 子中的梔子苷具有鎮(zhèn)痛和抗炎的作用；赤芍中的芍藥苷具有 保肝、抗腫瘤、神經(jīng)保護(hù)、心臟保護(hù)、抗血栓、抗氧化的作用；陳 皮中的橙皮苷具有抗動脈粥樣硬化及抗炎、抗氧化、抗菌、抗 癌、調(diào)節(jié)免疫力、防輻射、保護(hù)心血管系統(tǒng)的作用。為了完善該 制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，控制質(zhì)量，確保臨床應(yīng)用安全有效，本文建立 了同時(shí)測定該制劑中梔子苷、芍藥苷和橙皮苷三種成分含量的 高效液相色譜法。

LC-20AT 高效液相色譜儀，配備 SPD-20A UV/VIS 檢 測器（日本 SHIMADZU 公司）；METTLER TOLEDO MS205DU 電 子天平 （梅特勒-托利多儀器有限公司）；BWS-10 恒溫水浴鍋 （上海一恒科技有限公司）。

梔子苷對照品（批號：110749-201316，中國食品藥品 檢定研究院，含量 97.5%），芍藥苷對照品 （批號 110736- 200410，中國食品藥品檢定研究院），橙皮苷對照品 （批號 110721-201115，中國食品藥品檢定研究院，含量 95.3%）；梔陳 消癭膠囊 3 批，批號分別為 161220，170424，170619；水為純化 水，乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。

色譜柱為 InertSustain C18 Superb（4.6mm×250mm； 5μm）；以乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B）為流動相進(jìn)行梯度洗脫， 梯度洗脫程序?yàn)椋?～15min，15%A；15～35min，20%A。檢測波長： 0～15min 為 240nm，15～35min 為 283nm。柱溫為 35℃；流速為1.0mL·min-1。

取梔子苷、芍藥苷、橙皮苷對照品適 量，精密稱定，分別置 50mL 量瓶中，加甲醇制成濃度為 0.1997mg·mL-1、0.1780mg·mL-1、0.1990mg·mL-1 的對照品儲備溶 液，臨用前，精密吸取上述 3 種對照品儲備溶液各 1mL，置 5mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

取本品內(nèi)容物適量，研細(xì)，取約 2g，精 密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入 70%甲醇 50mL，稱定重量， 加熱回流 60min，取下，放冷，再稱定重量，用 70%甲醇補(bǔ)足減失 的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

取缺梔子、赤芍、陳皮的陰性樣品， 按“2.2.2”項(xiàng)下的方法操作，制得陰性對照溶液。

分別精密吸取對照品混合溶液、供試品溶液和 陰性對照溶液各 10μL，按規(guī)定的色譜條件進(jìn)樣。色譜圖表明，供 試品溶液中，在與梔子苷、芍藥苷、橙皮苷對照品相應(yīng)位置上有 保留時(shí)間一致的色譜峰，陰性對照溶液無干擾。2.4 線性關(guān)系考察：分別精密吸取對照品混合溶液 1、5、10、20、 30μL，注入高效液相色譜儀，按規(guī)定的色譜條件測定峰面積。以 進(jìn)樣量（μg）對峰面積（A）進(jìn)行線性回歸，得梔子苷回歸方程為 Y=2×106X+4353.5，r 2 =0.9999，芍藥苷回歸方程為 Y=1×106X217.98，r 2 =1，橙皮苷回歸方程為 Y=2×106X+52.03，r 2 =1，結(jié)果表 明，梔子苷在 0.0399～1.1970μg 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，芍藥苷在 0.0356 ～1.068μg 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，橙皮苷在 0.0398 ～ 1.194μg 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

梔子苷、芍藥苷、橙皮苷的含量測定，現(xiàn)多 采用反相高效液相色譜法，梔子苷流動相為乙腈-水（15∶85），檢 測波長為 238nm、芍藥苷流動相為甲醇-0.05mol/L 磷酸二氫鉀 溶液（40∶65），檢測波長為 230nm、橙皮苷流動相為甲醇-醋酸水 （35∶4∶61），檢測波長為 283nm 。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)檢測波長采用240nm 時(shí)得到的梔子苷和芍藥苷的峰高合適；但檢測不到橙皮 苷。波長采用 283 時(shí)得到的峰高合適；但梔子苷和芍藥苷峰高 較低。故采用雙波長。

本研究曾選用不同比例的乙腈-水、乙腈0.2%磷酸溶液、乙腈–0.5%冰醋酸溶液、甲醇-0.1%磷酸溶 液、甲醇-水溶液等系統(tǒng)為流動相作了系統(tǒng)地比較，結(jié)果表 明，以乙腈-0.2%磷酸溶液（15∶85）作為流動相時(shí)，梔子苷、芍藥 苷、橙皮苷峰形較好，分離度也好。因此，選擇乙腈-0.2%磷酸溶 液（15∶85）作為流動相。

本研究在供試品溶液的制備過程 中，曾選用甲醇、70%甲醇、60%甲醇、70%乙醇、60%乙 醇分別加熱回流 60min，結(jié)果所得供試液色譜基本一致，以 70%甲醇為溶劑加熱回流 60min 測定的含量最高。再以甲醇 為溶劑分別加熱回流 20min、30min、60min， 結(jié) 果 加 熱 回 流 20min 與 加 熱 回 流 30min 的供試液測定值低于加熱回流 60min。故確定以 70%甲醇加熱回流提取 60min 作為制備供試 品溶液的條件。