麥角硫因不能由動(dòng)物機(jī)體或者人體自身合成,主要存在于一些細(xì)菌和真菌中。在合成麥角硫因的微生物中,杏鮑菇、金針菇等常見食用菌中麥角硫因的含量高且具有天然安全性,是制備麥角硫因的良好資源。上海一恒科學(xué)儀器有限公司發(fā)現(xiàn)目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)麥角硫因的研究多集中于功能研究,提取方面的報(bào)道一般為水或其它溶劑對(duì)常見食用菌的簡(jiǎn)單浸提。對(duì)于生物體內(nèi)活性物質(zhì)的提取,合適的工藝條件可大大提高目標(biāo)產(chǎn)物的提取量,縮短提取時(shí)間,減少提取過(guò)程中對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物的損耗。而食用菌麥角硫因的得率亦會(huì)受溶劑、溫度等因素的影響。因此,有必要對(duì)食用菌麥角硫因的提取工藝條件進(jìn)行深入研究。本研究上海一恒科學(xué)儀器有限公司以杏鮑菇為對(duì)象,使用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)對(duì)杏鮑菇中麥角硫因的條件進(jìn)行優(yōu)化,為杏鮑菇麥角硫因的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。
1 材料與儀器
杏鮑菇 取無(wú)蟲害、無(wú)機(jī)械損傷、大小均一的樣品用于實(shí)驗(yàn),廣東藍(lán)田農(nóng)業(yè)有限公司;麥角硫因標(biāo)準(zhǔn)品 美國(guó) Sigma 公司;乙醇、甲醇、丙酮(分析純),甲醇、乙腈(色譜純) 廣州叢源試劑公司。
LC2130 高效液相色譜儀 上海天美科學(xué)儀器有限公司;FD-1-50真空冷凍干燥機(jī) 天津比朗實(shí)驗(yàn)儀器制造有限公司;DHG-9420A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科學(xué)儀器有限公司;MAS-Ⅱ微波萃取儀 上海新儀微波化學(xué)科技有限公司;低溫連續(xù)相變萃取裝置 珠海共同機(jī)械有限公司;JY92-2D超聲細(xì)胞粉碎機(jī) 寧波新芝生物科技股份有限公司。
上海一恒DHG-9420A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱
1.2 干燥方式的選擇
對(duì)照組:取100g新鮮杏鮑菇,使用粉碎機(jī)將其充分粉碎成粉末狀,加入適量的70%乙醇與其充分混勻、溶解,接著8000r/min離心10min,取上清液用 70%乙醇定容,用HPLC法測(cè)定麥角硫因含量。
熱風(fēng)干燥:取100g新鮮杏鮑菇放置于烘箱中干燥至恒重(溫度設(shè)置為50℃),然后使用粉碎機(jī)將其充分粉碎成粉末狀,加入適量的70%乙醇與其充分混勻、溶解,接著8000r/min離心10min,取上清液用70%乙醇定容,用HPLC法測(cè)定麥角硫因含量。
真空冷凍干燥:取100g新鮮杏鮑菇置于超低溫冰箱12h迅速降溫冷凍后,進(jìn)行真空冷凍干燥至恒重。然后使用粉碎機(jī)將其充分粉碎成粉末狀,加入適量的70%乙醇與其充分混勻、溶解,接著8000r/min離心10min,取上清液用 70%乙醇定容,用HPLC法測(cè)定麥角硫因含量。
2干燥方式的選擇
上海一恒科學(xué)儀器有限公司由圖1可知,熱風(fēng)處理后提取得到杏鮑菇的麥角硫因含量為(0.11±0.02)mg/g濕重,顯著低于其它兩種處理方法;而新鮮杏鮑菇和經(jīng)真空冷凍處理后的杏鮑菇干粉中麥角硫因含量分別為(0.21±0.01)mg/g、(0.20±0.02)mg/g濕重,二者無(wú)顯著差異。利用熱風(fēng)干燥對(duì)樣品進(jìn)行干燥時(shí),組織部的水分會(huì)迅速蒸發(fā),這會(huì)對(duì)組織結(jié)構(gòu)造成很大的破壞,因此熱風(fēng)干燥容易導(dǎo)致杏鮑菇中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損失。新鮮的杏鮑菇含水量高,易發(fā)生腐敗變質(zhì),不耐貯藏,不適于工業(yè)生產(chǎn)。而使用真空冷凍處理后的杏鮑菇含水量降低,并且低溫處理可減少營(yíng)養(yǎng)成分的損失,接著對(duì)處理后的材料進(jìn)行充分粉碎后,也可提高麥角硫因在溶劑中的浸出率。故采用真空冷凍干燥對(duì)杏鮑菇進(jìn)行干燥處理。
圖 1 干燥方式對(duì)麥角硫因含量的影響
3 結(jié)論
真空冷凍干燥對(duì)杏鮑菇中麥角硫因造成的損失很少,適用于對(duì)杏鮑菇進(jìn)行前處理;采用經(jīng)真空冷凍干燥后的杏鮑菇粉末作為原材料,運(yùn)用單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面法對(duì)杏鮑菇麥角硫因提取工藝進(jìn)行優(yōu)化,確定液料比48:1、53%乙醇、微波條件(500W、65℃、5 min)、超聲條件(450W、5min)為最佳工藝條件,該條件下可從杏鮑菇中提取得到麥角硫因(3.79±0.02)mg/g干重,與預(yù)測(cè)值誤差在1%以內(nèi),得到的二次回歸方程合理可靠,具有一定的可行性。本研究上海一恒科學(xué)儀器有限公司得到的提取方法可為食用菌中麥角硫因的提取提供參考,具有廣闊的應(yīng)用前景。